page_banner

Նուկլեինաթթվի հայտնաբերման ֆլուորեսցենտային քանակական Ct արժեքը – սեր-ատելություն պարամետր

Նուկլեինաթթվի հայտնաբերման ֆլուորեսցենտային քանակական Ct արժեքը – սեր-ատելություն պարամետր

«Նոր կորոնար վիրուսային թոքաբորբի ախտորոշման և բուժման ծրագիրը (Փորձնական իններորդ հրատարակություն)» օգտագործում է նուկլեինաթթվի հայտնաբերման Ct արժեքը ≥35 որպես մեկուսացման կառավարման կամ արտահոսքի ազատման կարևոր հիմքերից մեկը:Այսպիսով, ի՞նչ է ներկայացնում նուկլեինաթթվի հայտնաբերման հավաքածուի Ct արժեքը:Արդյո՞ք տարբեր փաթեթների Ct արժեքները համադրելի են:Արդյո՞ք որքան ցածր է Ct-ի արժեքը, այնքան լավ է լրակազմի աշխատանքը:
Ct արժեքը (շեմային ցիկլ, Ct) PCR ցիկլերի քանակն է, երբ իրական ժամանակի ֆլյուորեսցենտային քանակական ֆլուորեսցենտային ազդանշանի ինտենսիվությունը գերազանցում է սահմանված շեմը:Նուկլեինաթթվի հայտնաբերման հավաքածուները որպես օրինակ վերցնում են նոր թագը:Նույն փաթեթի նույն ռեակցիայի համար վիրուս պարունակող երկու նմուշ՝ A և B հայտնաբերելու համար, Ct արժեքի չափը որոշակի չափով ներկայացնում է վիրուսային գենի պատճենների քանակը, այսինքն՝ վիրուսային բեռը:Որքան ցածր է B նմուշի Ct-ն, այնքան բարձր է վիրուսային բեռը:Ct-ի արժեքը հակադարձ համեմատական ​​է վիրուսային բեռին և դրա վարակիչությանը:Իրական ժամանակի տարբեր ֆլուորեսցենտային քանակական հավաքածուների դրական և բացասական կողմերը չեն կարող դատվել բացառապես Ct արժեքի չափով, քանի որ տարբեր փաթեթների Ct արժեքները համեմատելի չեն:Կոմպլեկտի կատարողականի գնահատումը պետք է չափվի զգայունության (նվազագույն հայտնաբերման սահմանը), առանձնահատկությունների, ճշգրտության, կայունության և ախտորոշիչ կիրառման ասպեկտներից:Ռեակտիվների յուրաքանչյուր արտադրող ունի իր մարտարվեստի տասնութ տեսակները, և նրանք ունեն իրենց կախարդական ուժերը կիրառման մեջ, ուստի ես այստեղ մանրամասների մեջ չեմ խորանա:
Պայմանական իրական ժամանակում քանակական PCR (QPCR) վերլուծության գործիքների/համակարգերի համար Ct արժեքների ձեռքբերումը և դրանց համատարած օգտագործումը պաթոգենների հայտնաբերման ծրագրերում ծանոթ են բոլորին:Արդյունաբերության զարգացման և տեխնոլոգիաների առաջընթացի հետ մեկտեղ QPCR սարքավորումները և ռեակտիվները բախվել են հնարավորությունների և մարտահրավերների:Yiou Think Tank-ը (2021 թվականի հետազոտական ​​զեկույց Չինաստանի գենետիկ փորձարկման արդյունաբերության վերաբերյալ. տեխնոլոգիա) վերլուծել է, որ իմ երկրի QPCR արդյունաբերության ընկերությունների մեծ մասը բախվում է ընդհանուր խնդիրների՝ հիմնված տեխնոլոգիայի վրա:Ի պատասխան այս խնդիրների՝ լուծումները հիմնականում բաժանվում են երկու տեսակի՝ տեխնոլոգիաների կատարելագործման արագացում և նոր տեխնոլոգիաների ներդրում։
POCT-ը QPCR մոլեկուլային ախտորոշման համար արդյունաբերության զարգացման ուղղություններից մեկն է, և կատարողականի բարելավումը կարևոր գործոն է տեխնոլոգիայի կիրառումը արագացնելու համար:QPCR-ի մեկ նմուշի թողունակությամբ POCT սարքավորումների համար ինչպե՞ս օպտիմալացնել հետազոտության և զարգացման մեկ ռեակցիայի հիմնական պարամետրի Ct արժեքը:Նույն սարքավորումը, նույն ռեակցիայի համակարգը և կաղապարի նույն կոնցենտրացիան, տեսականորեն որքան մեծ է մեկ ռեակցիայի Ct արժեքը, այնքան ցածր է ֆերմենտի արդյունավետությունը ռեակցիայի մեջ:
Ֆերմենտային ռեակցիայի արդյունավետության բարելավման և Ct-ի արժեքի օպտիմալացման գործընթացում նախ կարող է վերլուծվել տիպիկ 40 PCR ցիկլի ֆլուորեսցենտային քանակական ուժեղացման կորը:Ստորև նկարում ներկայացված ուժեղացման կորը բաժանված է լյումինեսցենտային ֆոնային փուլի, էքսպոնենցիալ ուժեղացման փուլի, գծային փուլի և սարահարթի փուլի:Ավելի ցածր ֆլյուորեսցենտային ֆոնի հասնելու համար, որքան հնարավոր է այն տարբերելու վաղ էքսպոնենցիալ ուժեղացման ֆլյուորեսցենտային արժեքից, անհրաժեշտ է փորձարկել ռեակցիայի ծախսվող նյութերի կրիչից, այբբենարանի զոնդի նախագծման ցուցադրությունից և ռեակցիայի բուֆերային համակարգից:Էքսպոնենցիալ ուժեղացման շրջանը ֆերմենտային ակտիվության ամենաուղիղ ռեակցիան է, ինչպես նաև POCT սարքավորումների, ռեակցիայի կրիչների և ռեակտիվների կատարյալ համակարգման ապացույցն է:Այս պահին սարքավորումների ջերմաստիճանի վերահսկումը, օպտիկական ազդանշանի ստացումն ու վերլուծությունը, կրիչի կենսահամատեղելիությունը և ռեակտիվների համակարգի կատարումը պետք է ճշգրտվեն և փորձարկվեն բոլոր առումներով:Վերջապես, ամբողջ ուժեղացումը ավարտված է, և արդյունքները պետք է ներկայացվեն խիստ տվյալների ալգորիթմով, որպեսզի ստացվի ողջամիտ Ct արժեք:
CT գիծ
Ct-ի արժեքի օպտիմալացման մի փոքր քայլ է հետազոտության և զարգացման անձնակազմի անթիվ քայլերը:Օր ու գիշեր անհանգստության ու ոգևորության մեջ ամեն անգամ, երբ «սարերն ու գետերը չեն երևում, ուռիները մութ են, ծաղիկները՝ պայծառ, և կա ևս մեկ գյուղ», որը մեզ քաջություն և կիրք է տալիս առաջ գնալու։ կրկին.


Հրապարակման ժամանակը՝ Sep-29-2022